Конфокальная микроскопия и TIRF LiveScan SFC

Сочетание преимуществ системы формирования конфокальных изображений с универсальностью обычных микроскопов для исследования живых клеток.

Конфокальный микроскоп LiveScan SFC, разработанный Nikon, позволяет воспроизводить конфокальные изображения живых клеток с помощью нового оптического устройства, сочетающего режимы сканирования точечного отверстия и щели в одном микроскопе.

Сканирование изображения щели на исследуемой области образца обеспечивает более быструю регистрацию изображений, в то время как режим сканирования изображения точечного отверстия позволяет получить более высокое пространственное разрешение.

Теперь у исследователи могут выбрать сканирующую систему, с мощностью и набором функций, наиболее подходящими для конкретной области.

Функциональные особенности LiveScan SFC

Технология Swept Field

При исследовании многомерных изображений клеток (X,Y,Z,T или даже X,Y,Z,T с несколькими координатами), наблюдении быстрых нейронных процессов или при наблюдении за быстро изменяющимися изображениями клеток, конфокальный микроскоп с изменяющимся полем Nikon LiveScan SFC – это самые передовые технологии для ваших исследований.

В отличие от конфокальной системы с фиксированными апертурами точечных отверстий, Nikon LiveScan SFC позволяет выбрать размер точечного отверстия или щели, наиболее соответствующий объективу. Гальванометрические и пьезо-регулируемые зеркала развертывают изображения точечного отверстия или щели на плоскости образца, в то время как сама апертура остается неподвижной. Излучаемые фотоны направляются через дополнительно установленные точечные отверстия или щель в ПЗС-камеру. За счет разделения потоков излучения возбуждения и испускаемого света, при одновременной фиксации апертуры, и с помощью решетки линейных апертурных диафрагм, LiveScan SFC значительно снижает перекрестные помехи и шумы, предоставляя максимум гибкости и универсальности.

Преодоление ограничений обычных конфокальных систем сканирования поля

Технология Swept Field «развертки поля» позволяет преодолеть многие ограничения обычных конфокальных систем, такие как отсутствие синхронизации между перемещаемыми точечными отверстиями и ПЗС-камерой, перекрестные помехи между изображениями различных точечных отверстий и ограниченный выбор объективов. Поскольку LiveScan позволяет выбрать размер апертуры, для обеспечения максимальной разрешающей способности изображений, могут использоваться несколько объективов с различными увеличениями и числовыми апертурами.

Кроме того, пользователи могут регулировать время регистрации и облучения исследуемой области лазерным пучком с помощью ПО NIS-Elements, а также частоту и продолжительность каждой развертки сканера, обеспечивая максимальную гибкость управления сканером.

Микроскоп Nikon LiveScan SFC позволяет выбрать точечные отверстия трех диаметров (от 30 до 60 мкм), а также четыре режима сканирования щели (от 22 мкм до 70 мкм), для оптимизации параметров чувствительности, разрешения и скорости сканирования в соответствии с требованиями исследований.

Совершенная гибридная конструкция

Для обеспечения максимальной гибкости при выборе скорости и разрешения, в конфокальном микроскопе LiveScan SFC Nikon, используются как линейные решетки фиксированных точечных отверстий разных размеров по выбору пользователя, так и щелей.

Пользователь может выбрать конфокальное точечное отверстие, такого диаметра, который в наибольшей степени соответствует их требованиям к воспроизведению изображений, что значительно повышает рабочие характеристики системы, за счет оптимального выбора соотношения чувствительности и разрешения. Если требуется очень высокое временное разрешение, SCF может использоваться в режиме щелевого сканирования, при этом пользователь по своему выбору может установить одну из четырех щелей соответствующей ширины.

Гибридная конструкция системы сочетает в себе тандемную технологию сканирования с гальванометрической разверткой изображения. Апертуры остаются неподвижными (отсутствуют помехи синхронизации), в то время как гальванометрическое зеркало развертывает изображение решетки точечных отверстий в плоскости образца. Затем точки «обратно развертывают» сигнал в ПЗС- камеру, создающую изображение. Высокоэффективная оптическая система захватывает больший поток фотонов, чем при использовании обычной микроскопии, при уменьшенном потоке обратно отраженного света из-за воздействия входящего излучения, перекрестных помех и шума.

Апертура стационарного точечного отверстия устраняет искажения, наблюдаемые при высокой частоте кадров с помощью других полевых сканирующих конфокальных систем. Вы также можете установить точечное отверстие другого размера, выбрав диаметр, наиболее соответствующий увеличению и числовой апертуре объектива. Передовая технология и гибкость системы позволяют получить исключительно четкие и детализированные изображения живых культур.

Высокая скорость
При выборе камеры, возможна* частота кадров до 100 кадров в секунду (к/с) в режиме сканирования изображения точечного отверстия и до 1000 к/с в режиме сканирования изображения щели. Идеальной для живых образцов является очень низкая частота, сводящая к минимуму влияние фотообесцвечивания и фототоксичности.

*частота кадров зависит от скорости считывания используемого фотоприемника.

Максимальное разрешение
Наличие трех точечных отверстий позволяет выбрать точечное отверстие такого размера, который наилучшим образом соответствует различным объективам. В режиме сканирования изображения точечного отверстия, осевое разрешение микроскопа LiveScan SFC достигает значений, близких к разрешению при конфокальном сканировании изображения точечного отверстия.

Различные конфигурации лазера
Предлагаются лазеры 6 спектральных линий.

Выбор фотоприемных устройств
Совместимы с различными камерами, включая камеры Nikon DQC-FS , Roper Coolsnap HQ2 и Roper Cascade 128+.

Интуитивно-понятное и мощное программное обеспечение
Микроскоп LiveScan SFC полностью интегрируется в программу обработки изображений Nikon’s NIS-Elements, что обеспечивает легкость использования, контроль и создает много возможностей, включая шестимерную регистрацию, высокую скорость регистрации изображений по оси Z, высокую скорость многократного возбуждения, обращение свертки двумерного изображения (деконволюция) в реальном времени, простую макро-функцию и множество других функций обработки и измерения изображений.