Конфокальная микроскопия и TIRF система конфокальной лазерной микроскопии A1

Компания Nikon вывела конфокальную мироскопию на принципиально новый уровень.

Cистема A1 — это новая, полностью автоматизированная конфокальная система формирования микроизображений компании Nikon, создающая высококачественные конфокальные изображения клеточных и молекулярных процессов с высокой скоростью и великолепной чувствительностью.

Идеальная система для широкого диапазона применений, модель A1 вобрала в себя самые новейшие оптические и электронные технологии, что обеспечило невиданное ранее качество и универсальность.

Функциональные особенности
Обзор

Новые технологии, применяемые в серии конфокальных микроскопов A1 компании Nikon, поднимают конфокальную микроскопию на непревзойденные уровни качества и универсальности. Предлагаются две модели микроскопа – полностью автоматизированный микроскоп A1 и специализированный A1R.

В модели A1 используются обычные парные гальванометры, создающие изображения с высоким разрешением (до 4096 x 4096 пикселей), в то время как A1R оснащен уникальной гибридной системой сканирования (30 кадров в секунду, 512 x 512 пикселей).

Система позволяет осуществлять сверхбыструю регистрацию изображений с непревзойденным качеством. Более того, благодаря использованию гибридного сканера, возможна одновременная фотоактивация и регистрация изображений, что крайне важно для наблюдения динамичных процессов и взаимодействия клеточных структур.

Уникальная гибридная технология сканирования
Сверхбыстрая регистрация изображений с частотой 230 кадров в секунду.

Модель A1R оснащается сканером с резонансной частотой 7.8 кГц, который позволяет выполнять высокоскоростную регистрацию изображений со скоростью 230 кадров в секунду (512 x 64 пикселей). Более того, поле зрения сканируемой области почти в 5 раз больше, чем у нерезонансного сканера. Метод генерации тактовых импульсов, разработанный компанией Nikon, обеспечивает высокое качество создаваемых изображений даже при самой высокой скорости. Оптоволоконная система передачи данных обеспечивает передачу с максимальной скоростью 4Гбит/сек.

Высокоскоростная регистрация изображений при фотоактивации

Благодаря тому, что в одном модуле установлены как нерезонансный, так и резонансный сканеры, фотоактивация и документирование флуоресцентных изображений осуществляется одновременно, без использования для фотоактивации отдельного лазерного модуля.

С помощью резонансного сканера, способного фиксировать изображения с высокой скоростью, стала возможной регистрация быстрых изменений после фотоактивации.

Участки в плоскости исследуемых клеток и изменение интенсивности флуоресценции (от точки, расположенной ближе к активированной: красный, синий, фиолетовый)

Как работает гибридная технология
Уникальный гибридный сканер компании Nikon позволяет использовать два гальванических сканера (нерезонансный и резонансный) с высокоскоростным гипер-селектором, как совместно, так по отдельности.

Улучшенная регистрация и создание спектральных изображений
Быстрая регистрация спектральных изображений по 32 каналам
Стала возможной ускоренная регистрация спектральных изображений со скоростью 16 кадров в секунду (512 x 64 пикселя).
Спектральное разделение сигналов в реальном времени
Процесс разделения сигналов флуоресценции при регистрации изображений занимает менее одной секунды.

Флуоресцентный реагент: anti-tubulin/Alexa488 (microtubule), Histone H2B-GFP (chromosome)
Specimen courtesy of: Dr. Tokuko Haraguchi, Kobe Advanced ICT Research Center, NICT
Анти-тубулин/Алекса488 (хромосомная микротрубочка), Гистон Н2В-GFP (хромосома)
Фото предоставлены д-ром Токуко Харагучи, Центр передовых исследований Kobe, NICT

Высокое качество изображений за счет более эффективного детектирования света

Благодаря схеме расположения дихроичных зеркал в сканирующей головке, основанной на методе малого угла падения луча, обеспечивается 98% светопропускания и 30% увеличения эффективности флуоресцентного излучения.

Это позволяет получать более яркие изображения и снизить интенсивность лазерного облучения, сводя тем самым к минимуму повреждение живых клеток.

Модуль VAAS с точечным отверстием для получения ярких и четких изображений

Компания Nikon ввела еще одно новшество в области конфокальной микроскопии, назвав его VAAS (Виртуальная система с изменяемой апертурой, опция), которая устраняет паразитные засветки, сохраняя при этом яркость изображения.

За счет деконволюции света, проходящего через точечное отверстие и света, не проходящего через него, становится возможной регистрация ярких изображений с минимальными засветками. После регистрации изображения также возможно проведение дифференциального послойного анализа (толщины слоев).

Специальное программное обеспечение NIS-Elements C1 обладает гибкостью и простотой в использовании

Для проведения разнообразных конфокальных исследований, Nikon предлагает простое в использовании программное обеспечение, разработанное на основе передового программного комплекса NIS-Elements.